THÔNG TIN LUẬN ÁN TIẾN SĨ ĐƯA LÊN MẠNG

Tên đề tài luận án: “Tiêu chuẩn hóa dược liệu, cao alkaloid và cao flavonoid từ Khổ sâm bắc (Sophora flavescens Ait.) trồng tại Đắk Nông”

Chuyên ngành: Kiểm nghiệm thuốc – độc chất    Mã số: 62.72.04.10

Họ và tên nghiên cứu sinh: Phan Nguyễn Trường Thắng

Họ và tên người hướng dẫn: PGS.TS. Nguyễn Ngọc Vinh

                                              PGS.TS. Trần Anh Vũ

Tên cơ sở đào tạo: Đại học Y Dược Thành phố Hồ Chí Minh

TÓM TẮT NHỮNG KẾT LUẬN MỚI CỦA LUẬN ÁN

Tổng quan: Khổ sâm bắc (Sophora flavescens Ait) là dược liệu di thực với nhiều tác dụng quý. Các nhóm hoạt chất chính trong dược liệu này là alkaloid và flavonoid trong đó có 2 hoạt chất được xác định gây độc gan là kurarinon, sophoraflavanon G.

Đối tượng và phương pháp nghiên cứu: Alkaloid, flavonoid, cao chiết và dược liệu từ rễ Khổ sâm bắc. Nghiên cứu sử dụng phương pháp: chiết xuất – ngấm kiệt, chiết phân bố lỏng-lỏng, kết tinh phân đoạn, sắc ký cột cổ điển, sắc ký điều chế để điều chế cao và phân lập tinh chế các alkaloid và flavonoid. Phương pháp phổ nghiệm hiện đại để xác định cấu trúc và độ tinh khiết của các alkaloid và flavonoid phân lập được. Phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao để định tính, định lượng alkaloid, flavonoid trong dược liệu, cao chiết Khổ sâm bắc. Đồng thời, sử dụng phương pháp tạo màu, đo độ hấp thu để thử tác dụng chống oxy hóa, hoạt tính độc tế bào và ức chế enzym acetylcholinesterase.

Kết quả: Nghiên cứu đã phân lập và xác định cấu trúc của 04 alkaloid là matrin, oxymatrin, sophoridin, oxysophocarpin và 04 flavonoid là kurarinon, (2S)-2’-methoxykurarinon, sophoraflavanon G và isoxanthohumol. Đồng thời đã thiết lập được 03 alkaloid (matrin, oxymatrin và sophoridin) và 03 flavonoid (kurarinon, isoxanthohumol, sophoraflavanon G) đạt yêu cầu chất đối chiếu thứ cấp. Nghiên cứu đã xây dựng và thẩm định 2 quy trình định tính, định lượng đồng thời 03 alkaloid trong cao alkaloid và dược liệu; quy trình định tính, định lượng đồng thời 03 flavonoid trong cao flavonoid và dược liệu bằng phương pháp HPLC-PDA.Đã ứng dụng theo dõi hoạt chất trên 6 lô dược liệu ở 5 điểm trong 24 tháng. Nghiên cứu sinh học thu được kết quả: cao toàn phần ức chế 69,22 % hoạt tính của enzym AchE; isoxanthohumol, kurarinon; sophoraflavanon G độc tế bào ung thư vú MDA-MB-231; cao flavonoid: EC₅₀ là 720,57 ± 8,71 µg/ml với oxy hóa MDA; cao toàn phần: EC₅ 254,48 ± 6,43 µg/ml, cao flavonoid: EC₅₀ 139,57 ± 6,47 µg/ml và Sophoraflavanon G: EC₅₀ 691,58 ± 20,83 µg/ml. Nghiên cứu đã đề xuất chuyên luận dược liệu Khổ sâm bắc vào Dược điển Việt Nam VI và tiêu chuẩn cở sở cho cao alkaloid, cao flavonoid chú trong kiểm soát hàm lượng kurarinon, sophoraflavanon G để hạn chế độc tính khi sử dụng.

Kết luận: Luận án đã thiết lập được 6 chất đối chiếu và xây dựng được 2 quy trình định tính, định lượng trong cao và dược liệu đồng thời đề xuất chuyên luận dược liệu và cao alkaloid, cao flavonoid từ Khổ sâm bắc.

ONLINE Ph.D. DISSERTATION INFORMATION

The Ph.D. Dissertation title: Standardization of herbal medicine, alkaloid and flavonoid extracts from Sophora flavescens Ait., cultivated in Dak Nong.

Specialty: Drug quality control – Toxicology        Code: 62.72.04.10

Ph.D. candidate: Phan Nguyen Truong Thang

Supervisor 1: Associate Professor Nguyen Ngoc Vinh

Supervisor 2: Associate Professor Tran Anh Vu

Academic institute: University of Medicine and Pharmacy at Ho Chi Minh City 

SUMMARY OF NEW FINDINGS

Background: Sophora flavescens Ait. is a valuable medicinal herb renowned for its diverse properties. The primary active compounds in this plant are alkaloids and flavonoids, in which includes two identified hepatotoxic agents: kurarinon and sophoraflavanone G.

Objectives and methods: The study focused on alkaloids, flavonoids, extracts, and medicinal plant derived from radix of Sophora flavescens (SF). The research employed various extraction methods such as maceration, liquid-liquid extraction (LLE), fractional crystallization, column chromatography, and preparative chromatography to produce extracts and isolate alkaloids and flavonoids. Modern spectroscopic methods were used to identify the structures and purity of the isolated alkaloids and flavonoids. High-performance liquid chromatography (HPLC) was utilized for qualitative and quantitative analysis of alkaloids and flavonoids in medicinal materials and extracts from SF. Additionally, colorimetric methods and absorbance measurements were used to assess antioxidant activity, cytotoxicity, and acetylcholinesterase inhibition.

Results: The study isolated and determined the structures of four alkaloids (matrin, oxymatrin, sophoridin, oxysophocarpin) and four flavonoids (kurarinone, (2S)-2’-methoxykurarinone, sophoraflavanone G, isoxanthohumol). Furthermore, three alkaloids (matrin, oxymatrin, sophoridin) and three flavonoids (kurarinone, isoxanthohumol, sophoraflavanone G) met secondary reference standard requirements. Two qualitative and quantitative procedures for three alkaloids in alkaloid extract and medicinal materials, as well as three flavonoids in flavonoid extract and medicinal materials, were developed using HPLC-PDA. The active compounds were monitored in six batches of SF at five stages over 24 months. Biological research revealed that the whole extract inhibited 69.22 % of AchE enzyme activity; isoxanthohumol, kurarinon, and sophoraflavanone G exhibited anti-breast cancer activity against MDA-MB-231 cells; flavonoid extract demonstrated an EC50 of 720.57 ± 8.71 µg/ml for MDA oxidation; the whole extract EC5 was 254.48 ± 6.43 µg/ml, flavonoid extract EC50 was 139.57 ± 6.47 µg/ml, and Sophoraflavanone G: EC50 was 691.58 ± 20.83 µg/ml. The study proposed the inclusion of Sophora flavescens Ait. in the Vietnamese Pharmacopoeia VI and the establishment of quality standards for alkaloid and flavonoid extracts to regulate the amounts of kurarinone and sophoraflavanone G, ultimately reducing potential toxicity during usage.

Conclusion: The thesis has successfully introduced six reference standards and formulated two qualitative and quantitative methods for extracts and medicinal materials. Furthermore, it suggested incorporating Sophora flavescens Ait. into the pharmacopoeia and defining standards for alkaloid and flavonoid extracts.

Keywords: Sophora flavescens Ait., kurarinone, sophoraflavanone G, alkaloid and flavonoid extracts. Ho

LUẬN ÁN

TÓM TẮT LUẬN ÁN