THÔNG TIN LUẬN ÁN TIẾN SĨ ĐƯA LÊN MẠNG

Tên đề tài luận án: “Nghiên cứu thành phần hóa học hướng tác dụng sinh học của cây Xáo tam phân (Paramignya trimera (Oliv.) Burkill) Rutaceae”

Chuyên ngành: Dược học cổ truyền.    Mã số: 62720406

Họ và tên nghiên cứu sinh: TRẦN THỊ THÚY QUỲNH

Họ và tên người hướng dẫn: TS. PHẠM ĐÔNG PHƯƠNG, PGS.TS. ĐỖ THỊ HỒNG TƯƠI

Tên cơ sở đào tạo: Đại học Y Dược Thành phố Hồ Chí Minh

TÓM TẮT NHỮNG KẾT LUẬN MỚI CỦA LUẬN ÁN

Đặt vấn đề: Xáo tam phân được bán nhiều trên thị trường nhưng có không nhiều thông tin về thành phần hóa học, tác dụng dược lý, kiểm nghiệm. Do đó, mục tiêu của đề tài nhằm nghiên cứu về thành phần hoá học, cơ chế tác dụng dược lý, định lượng một số hợp chất marker, góp phần tiêu chuẩn hóa dược liệu Xáo tam phân.

Đối tượng và phương pháp nghiên cứu: Xáo tam phân (rễ, thân, lá) được khảo sát hoạt tính chống oxy hoá và độc tính tế bào ung thư in vitro của các cao chiết toàn phần và cao phân đoạn. Phân lập hợp chất từ các cao tiềm năng bằng sắc ký cột chân không, sắc ký cột cổ điển, xác định cấu trúc bằng phổ MS, NMR, DEPT, HSQC, HMBC và COSY. Đánh giá hoạt tính độc tế bào in vitro của các hợp chất phân lập được. Thiết lập chất đối chiếu theo ISO 13528, xây dựng quy trình định lượng các marker, ứng dụng quy trình định lượng.

Kết quả: Nghiên cứu đã cho thấy 3 cao rễ, thân, lá đều thể hiện hoạt tính chống oxy hóa, cao thân có khả năng bắt gốc tự do mạnh nhất. Cao rễ có hoạt tính độc tế bào ung thư mạnh nhất trên cả 2 dòng tế bào MDA-MB-231 và HepG2. Cao phân đoạn kém phân cực (n-hexan, clorofrom) thể hiện hoạt tính mạnh hơn, tốt hơn các cao phân cực (ethyl acetat, nước). Đã phân lập được 12 hợp chất từ rễ và thân, trong đó hợp chất PT-6 được xem là chất mới và 5 hợp chất lần đầu công bố. Đã đánh giá hoạt tính độc tế bào của ostruthin và 8-methoxyostruthin trên hai dòng tế bào MDA-MB-231 và HAK1B và khảo sát cho thấy protein KDM2A ảnh hưởng đến tác động của 8-methoxyostruthin lên quá trình tăng trưởng của 2 dòng tế bào này. Ostruthin và 8- methoxyostruthin được thiết lập CĐC, hàm lượng từ 97,8%-99,0% tính theo nguyên trạng. Quy trình định lượng đồng thời demethylsuberosin, ostruthin và 8-methoxyostruthin bằng phương pháp HPLC đã thỏa mãn đầy đủ các yêu cầu theo hướng dẫn của ICH và AOAC. Ứng dụng để định lượng một số mẫu rễ Xáo tam phân thu mua trên thị trường tại các tỉnh thành Đà Lạt - Lâm Đồng, Vĩnh Cửu - Đồng Nai, TP. HCM, Tây Ninh, Bình Phước.

Kết luận: Đề tài đã phân lập được 12 hợp chất từ các cao và phân đoạn có tác dụng sinh học tiềm năng, bước đầu gợi ý cơ chế tác động của hoạt tính độc tế bào ung thư của 8-methoxyostruthin là ức chế sự biểu hiện của KDM2A. Đề tài đã xây dựng quy trình định lượng marker chính và ứng dụng quy trình kiểm nghiệm mẫu thu được trên thị trường.

Từ khóa: Paramignya trimera, Xáo tam phân, ostruthin, 8-methoxyostruthin, KDM2A

ONLINE Ph.D. DISSERTATION INFORMATION

The Ph.D. Dissertation title: “Study on chemical composition oriented by biological effect of Xao tam phan (Paramignya trimera (Oliv.) Burkill) Rutaceae”

Specialty: Traditional Pharmacy                        Code: 62720406

Ph.D. candidate: TRAN THI THUY QUYNH

Supervisor 1: PhD. PHAM DONG PHUONG

Supervisor 2: Associate Professor DO THI HONG TUOI, PhD.

Academic institute: University of Medicine and Pharmacy at Ho Chi Minh City 

SUMMARY OF NEW FINDINGS

Background: Paramignya trimera is widely sold in the market, but there is limited information on its chemical composition, pharmacological effects, and standardization. Therefore, the objective of this study is to investigate its chemical composition, the mechanism of its pharmacological effects, and to quantify some marker compounds, contributing to the standardization of Paramignya trimera as a medicinal material.

Objectives and Methods: The antioxidant activity and cytotoxicity against cancer cells in vitro of the total extracts and fractions from the roots, stems, and leaves of Paramignya trimera were investigated. Compounds from potential extracts were isolated using vacuum column chromatography and classical column chromatography. Their structures were determined using MS, NMR, DEPT, HSQC, HMBC, and COSY spectroscopy. The in vitro cytotoxic activity of the isolated compounds was evaluated. Reference substances were established according to ISO 13528, and quantitative procedures for the markers were developed and applied.

Results: The study revealed that all three extracts from the roots, stems, and leaves of Paramignya trimera exhibited antioxidant activity, with the stem extract showing the strongest free radical scavenging ability. The root extract demonstrated the strongest cytotoxic activity against both MDA-MB-231 and HepG2 cancer cell lines. The less polar fractions (n-hexane, chloroform) exhibited stronger activity compared to the more polar fractions (ethyl acetate, water). 12 compounds were isolated from the roots and stems, with compound PT-6 identified as a new substance and five compounds reported for the first time in Paramignya trimera. The cytotoxic activity of ostruthin and 8-methoxyostruthin was evaluated on MDA-MB-231 and HAK1B cell lines. It was found that the protein KDM2A influenced the effect of 8-methoxyostruthin on the growth of these cell lines. Ostruthin and 8-methoxyostruthin were established as reference substances, with a content of 97.8%-99.0% based on the original substance. A quantitative method using HPLC was developed to simultaneously determine demethylsuberosin, ostruthin, and 8-methoxyostruthin, meeting all requirements according to ICH and AOAC guidelines. This method was applied to quantify some root samples of Xao tam phan collected from various markets in Da Lat - Lam Dong, Vinh Cuu - Dong Nai, Ho Chi Minh City, Tay Ninh and Binh Phuoc.

Conclusion: The study isolated 12 compounds from the extracts and fractions with potential biological activity. Initial investigation suggested that the mechanism of the cytotoxic activity of 8-methoxyostruthin involves inhibiting the expression of KDM2A. The study also developed a quantitative procedure for the main markers and applied this procedure to test market samples.

Keywords: Paramignya trimera, Xao tam phan, ostruthin, 8-methoxyostruthin, KDM2A

LUẬN ÁN

TÓM TẮT LUẬN ÁN